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RNA退火緩沖液(5x)

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產(chǎn)品特點

科學研究

詳細介紹

產(chǎn)品簡介

Annealing Buffer for RNA Oligos (5×),即RNA寡核苷酸退火緩沖液,可以用于RNA Oligos的退火,可以有效避免RNA Oligos自身形成發(fā)夾結構,有利于退火的正確進行。該退火緩沖液不含RNase,可避免RNA的降解。


產(chǎn)品組分

組分名稱

產(chǎn)品貨號/規(guī)格

JY04013

JY04014

RNA退火緩沖液(5×)

2 mL

5 mL

DEPC水

8 mL

20 mL


保存條件

常溫配送。一個月內,4 oC保存。-20 oC長期保存,至少1年有效。


注意事項                                                                                                

1.RNA易降解,需嚴格遵守RNA操作規(guī)范,防止RNase污染。

2.本產(chǎn)品僅用于科學研究,不得用于臨床,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內。

3.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


使用說明

1.溶解Oligos

(1) 方法一:用去DEPC水將RNA退火緩沖液(5×)稀釋成1×。 → 將1× RNA Oligos用RNA退火緩沖液配制成100 μM(根據(jù)實驗要求調整濃度)。 → 取等體積RNA Oligo A和RNA Oligo B混勻。

(2) 方法二:將Oligos干粉用DEPC水配制成200 μM。 → 配置如下退火反應體系,混勻。

DEPC水      

30 μL

RNA退火緩沖液(5×)

20 μL

RNA Oligo A (200 μM)          

25 μL

RNA Oligo B (200 μM)          

25 μL

總體積   

100 μL

Note:Oligos的濃度根據(jù)實驗要求進行調整。

2.退火

(1) 方法一:將退火反應體系置于PCR儀中,設置反應條件:90℃變性1 min,-1℃/60s/cycle緩慢降溫至25℃。程序設置以Bio-Rad的T100為例為:1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65×; 4. 4℃, ∞。

(2) 方法二:將退火反應體系放于90°C水浴鍋,持續(xù)1 min。后將退火反應體系置于一杯含有90°C熱水的保溫杯中,讓其開蓋自然冷卻至室溫。若無保溫杯,則將退火反應體系置于2 L,90°C熱水中降至室溫亦可。

Note:緩慢降溫對形成正確的結構是非常有幫助的,降溫過快將導致錯誤高級結構的產(chǎn)生。

3.退火結束后可以直接用于轉染細胞,也可以-80oC凍存?zhèn)溆谩?/p>

 

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